Clase de Mutagenesis 27-10-21

Les dejo los papers de la mutagenesis puntual por PCR inversa.


2014-New-insights-into-the-QuikChangeTM-process-guide-the-use-of-phusion-DNA-pol-in-site-directeed-mutagenesisDescarga
Liu-2008-An-efficient-one-step-site-directed-deletion-insertion-single-and-multiple-site-mutagenesisDescarga

Y tambien el manual del usuario los kits:

-El denominado Quick change, es el que utliza primers 100% solapados, pero que no menciona la duplicacion de primers que charlamos:

200523-Quick-change-Stratagene-Primers-NO-phospho-1Descarga

-El denominado Q5 es utilizando primers fosforilados, o utilizando la Kinasa+Ligasa

https://international.neb.com/products/e0554-q5-site-directed-mutagenesis-kit#Product%20Information

Q5-Mutagenesis-Kit-NEBDescarga

Tambien les dejo un paper que tiene algunas metodologias de mutagenesis por Error prone PCR, y el viejo conocido metodo por Mn:

Rasila-2009-Error-prone-por-nucleoside-analogs-COMPARACION-DE-METODOS-y-MyM-de-cada-unoDescarga
Cadwell-1992-Random-pcr-librariesDescarga

Tambien les dejo un paper de DNA Shuffling, esta interesante por que muestran con geles reales como es el procedimiento de generación de la biblioteca de variantes al azar.

DNA_shuffling_by_random_fragmentation_and_reassembly._In_vitro_reconvination_for_molecular_evolutionDescarga